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水產品中亞硝酸鹽、甲醛、亞硫酸鹽的檢測方法及應用
發布日期:2019-03-02

      實驗分為三部分,第一部分建立了亞硝酸鹽檢測方法,并研究了亞硝酸鹽對水產養殖的影響及防治。利用NO2-與2,3-萘二銨反應生成強烈熒光物質的(C10H10N2 (DAN)+ HNO2→C10H7N3(NAT) +H2O)的原理,通過優化色譜條件:流動相V(雙蒸水):V(乙腈)=60︰40 (流速:0.8 mL/min),熒光檢測器在激發波長375 nm發射波長415 nm條件下檢測,線性范圍為0.01 mg/kg~4 mg/kg,線性回歸系數r=0.9999,方法檢出限為0.01 mg/kg,比分光光度計法檢出限(1.0 mg/kg),示波極譜法檢出限(0.24 mg/kg),熒光分析法(8 mg/kg),離子色譜(0.8 mg/kg)均低,平均加標回收率83.6%~96.5%,方法相對標準平均偏差1.0%~5.0%。

      研究了亞硝酸鈉在鯽魚體內的代謝及殘留情況,并對氯化鈉、溴化鈉可能影響鯽魚吸收NO2-進行初步探索,以20 mg/kg亞硝酸鈉浸浴,檢測數據采用3P97藥物代謝動力學軟件進行分析。結果表明:亞硝酸鈉的消除代謝可以用一級代謝二室模型來描述,亞硝酸鈉在血液和肌肉中的消除半衰期:5.36,7.98 d,總體清除率:83.1,54.7 mg/L(kg)/d,結果表明亞硝酸鈉在鯽魚體內代謝較為緩慢,肝臟、肌肉是其殘留的主要靶器官,易在其中積累,15d后亞硝酸鈉在可食用肌肉的殘留量為0.017 mg/kg,均低于目前國內外要求的殘留量0.2 mg/kg。三組個體分別曝于20 mg/L亞硝酸鈉環境下,兩組分別添加18.4g氯化鈉和30.0 g溴化鈉NO2-、Cl-(Br-)物質量比=20∶1。三種組織:肝臟、鰓和肌肉的檢測結果顯示加入氯化鈉、溴化鈉后各組織亞硝酸鈉的含量前者較后者低,表明Cl-對鯽魚吸收NO2-抑制作用比Br-明顯。同時用化學試劑二氧化氯、次氯酸鈉,物理試劑人造沸石粉、碳酸鈣、活性炭治理亞硝酸鈉的效果進行比較,結果表明二氧化氯效果最佳。第二部分,建立甲醛液相檢測方法,并研究了以鯽魚為代表的鮮活水產品中甲醛殘留。利用甲醛在酸性條件下與2,4-二硝基苯肼(2,4-dinitrophenylhydr azine,DNPH)反應生成2,4-二硝基苯腙的原理,甲醛含量在0.216~43.2μg/mL范圍內呈良好的線性關系,檢出限為0.13 mg/kg。比滴定法檢出限(100 mg/L),分光光度法(1 mg/L)低,前處理過程比蒸餾法提取甲醛省時,避免了因甲醛熔點、沸點低可能造成甲醛的揮發。采集鮮活的鯽魚等水產品進行檢測,結果表明:淡水較海水魚類平均甲醛天然含量較低,海水魚類中龍頭甲醛含量最高。鯽魚養殖過程中甲醛殺菌消毒,檢測體內含量較低,對人體健康危害較小。第三部分,建立了反相離子對色譜-柱后衍生法檢測水產品中亞硫酸鹽,檢測方法采用DTNB柱后衍生反相離子對色譜法檢測亞硫酸鹽的含量。

      提取樣品中亞硫酸鹽之后與甲醛結合生成羥甲基磺酸鹽,經過反相離子對色譜分離,在柱后衍生系統中,羥甲基磺酸鹽與氫氧化鉀反應重新生成亞硫酸根,后者與DTNB衍生生成5-巰基-2-硝基苯甲酸,在450 nm吸收波長處檢測。本方法最低檢出限為0.15 mg/kg,線性方程為y= 71.62855x +8.94270,相關系數為0.99972,平均回收率為93.6%。本方法與比色法相比避開了有毒物質四氯化汞的使用更環保,檢出險比離子色譜(0.33 mg/kg)更靈敏,比蒸餾-碘量法操作更節省時間。這三種化學物質的檢測方法均具有靈敏、快速、準確、簡便的優點。


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